有關細胞離心,我們對遇到的常見問題做一個總結:
1、細胞離心的轉速和時間。
2、細胞離心轉速太高會不會出現細胞死亡。
3、細胞離心多少g.
4、細胞離心目的和原理。
5、哪些實驗需要做細胞離心。
辛辛苦苦培養的細胞,如果因為離心轉速太高,出現細胞死亡,這種重新再來的心情小編深有體會,為了更好的做好實驗室離心機細胞分離的這一課,我們請來專家進行一一講解。
細胞離心機
因為轉速(RPM)不等同于相對離心力,同樣的轉速得到的離心效果并不盡相同,根本的解決方法還是使用相同的相對離心力(RCF)。
1.保證細胞轉移的*性
低速離心可以防止細胞液積存在管蓋和管壁,保證細胞轉移的*性。
2.便于控制細胞濃度
對于細胞濃度要求高的實驗,比如需要根據細胞數計算染料濃度的實驗,根據細胞數計算接種細胞量的傳代實驗,單細胞測序相關實驗等,在細胞計數、離心收集后再根據細胞數量確定重懸體積,更利于控制細胞濃度
◎ 原代細胞分離
◎ 細胞傳代培養
◎ 免疫細胞分離
◎ 檢測前細胞樣品處理
◎ 溫度敏感型細胞需要溫控精準,減少細胞溫度應激
◎ 細胞洗滌離心時,應盡量棄去上清,避免培養液/PBS 殘留,影響后續染色等操作
◎ 升降速過程可能造成細胞的機械損傷,離心時應控制升/降速率
◎ 細胞制品在收集過程應嚴格控制可能產生的污染
◎ 應將離心過程標準化,利于提高實驗的可重復性
轉子啟動運行后,升降速過程可能造成細胞的機械損傷; 活細胞的離心速度一定要低,優選水平離心,收集更充分。
不同類型細胞離心,它們適合的條件也不同。
傳代細胞離心收集:
離心條件:80g-300 x g,常溫或者 37°C,時間 3-5 min
檢測用細胞離心:
離心條件:100g-300 x g,常溫或者 4°C,時間 3-10 min
特殊細胞離心收集:
PBMC 分離條件,400 x g,4°C,20 min
◎ 升降速度可控,有利于細胞梯度離心,減少機械損傷,同時防止細胞重懸,保證細胞活率和回收率。
◎ 多種水平轉子可選,適配各種離心耗材,充分滿足實驗需求。
◎ 溫度控制精確,離心過程的溫度可實現 32°/35°/37° 等所需溫度,減少溫度變化對細胞的傷害。
◎ “At set RPM" 定速計時功能,可在達到預設轉速時才開始計時,去除了升至設定轉速時耗費的時間,確保離心時間為設定時間,實現離心的充分和可重復。
◎ 可選擇氣密性配件,減少污染風險。
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