離心機選擇指南:
1、要不要冷凍離心機?
要不要選擇冷凍離心機,取決于實驗具體應用以及經費狀況,
離心機中轉子/ 樣品的溫度取決于:
● 轉子的大小和空氣動力學阻力
● 轉子的裝載情況
● 選擇離心的速度以及運轉時間
● 環境溫度
● 非冷凍離心機的空氣熱交換性能
● 冷凍離心機的壓縮機性能
注意:任何阻擋空氣入口/出口的舉措都會大幅降低離心機制冷功能。
2、怎樣選擇離心機的離心速度?
● 在使用不同半徑的轉子進行離心同一樣品時,請選擇相同離心力(RCF),而不是相同轉速(RPM)
● 所有離心機有專門的按鍵進行離心力(RCF)和轉速的換算(RPM)
● 如果您所使用的離心機沒有離心力/ 轉速轉換功能,請參考前頁換算表。
3、是選擇固定角轉還是水平轉子?
● 因為離心的時候沉淀會聚集在離心管底部,選用45。固定角轉比小角度轉子能形成更緊密的沉淀。
● 在微量離心管沉淀DNA/ RNA 時,請將敞開的離心管管蓋的鉸鏈部分朝向外側,會幫助您方便地確定DNA 的位置,甚至在肉眼看不到的情況下也很容易除去上清,并且不影響沉淀。
水平轉子
無需高離心力的情況下,水平轉子擁有*的優點:
● 水平轉子由轉子本身和吊籃組成,吊籃可以容納各種規格試管的適配器,使得在不更換轉子的情況下擁有很高的靈活性。
● 離心的過程當中,吊籃被甩出去,處在水平的位置,沉淀全部位于試管的底部,而固定角轉離心的樣品總是以一定角度位于試管的一邊。所以,水平轉子更利于樣品的回收。
● 水平轉子停止離心時,試管總是處于垂直的方向,取出試管非常方便,不容易造成樣品的重懸;而固定角轉中,因試管的位置具有一定角度,為避免重懸需要倍加小心才行。
一、在選擇離心機時,需注意以下幾點性能:
● 離心力至少10,000 ×g 是用有機溶劑法從細胞或組織當中提取DNA/RNA 時所需zui低離心力。
● 為有效地用異丙醇或乙醇沉淀DNA/RNA,建議在4℃下離心,選用冷凍離心機。
● 為保證快速到達設定溫度,建議選擇有“fast temp” 快速控溫功能的離心機,選用快速控溫的離心機到達4℃的時間僅相當于普通離心機的一半。
二、在選擇離心機時,需注意以下幾點性能:
● 離心力至少10,000 ×g 是分離、純化、溶解DNA / RNA 所需的zui低離心力
● 使用膜技術的核酸抽提試劑盒,裂解液需要倒入離心分離柱“Spin Column”,然后進行離心分離,由于離心分離柱所配備的離心管的蓋子經常是需要打開的,蓋子會伸出轉子,離心時很容易斷裂。使用專門的具有加寬的轉子邊沿“kit”轉子可以解決此問題。
三、在選擇離心機時,需注意以下幾點性能:
● 可以用Ficoll 梯度密度離心的方法離心分離單核細胞。使用水平轉子離心時處于水平位置,停止后處于垂直的位置,可以得到分層效果良好的水平層。非常有利于后續的中間層包含單核細胞層的轉移。
● 具有“軟剎車”(soft brake)功能的離心機可以做到溫和降速。因此會有較少重懸發生,使分層保持明顯。
● 在離心傳染性樣品時,應該使用可以保證即使離心管破裂也不泄漏氣溶膠的氣密性轉子和氣密性蓋子。氣密性證書應由獨立的第三方出具。
● 使用可以在121℃,20 分鐘高溫高壓滅菌的轉子,確保有效地去除污染。
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